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看看:ATCC细胞培养方法几点

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发表于 2024-9-8 08:03:20 | 显示全部楼层 |阅读模式

  ATCC细胞操作方法。在此之前,ATCC官网的行情也在一度飙升,引起了广泛投资者的关注。http://www.biofeng.com/ATCC/

  
  (1)取成年新西兰大白兔,耳缘静脉注空气处死后,取下兔子的双腿,立即用75%乙醇浸泡。
  
  (2)移入细胞房内,去除双腿表面的皮毛及肌肉,剪取关节段,移至超菌工作台内。
  
  (3)PBS洗涤数次,用手术刀或弯剪将关节表面的软骨组织取下。
  
  (4)软骨组织块静置5min,弃去上层液体及悬浮组织,将软骨组织剪成1mm3的大小。移到离心管中加3倍体积的0.25%胰蛋白酶,置入37℃的恒温摇床中,振荡消化15-20min;
  
  (5) 4℃静置5min;弃上清,PBS洗涤,去上清。加入0.2%胶原酶II,置入37℃的恒温摇床中,振荡消化2H;
  
  (6)加入生长培养基终止消化,反复吹打后依次通过200目滤网。收集滤液,1200rpm离心8min,弃上清,用DMEM完全培养基重新悬浮细胞, 放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
  
  (7)细胞传代后放入预置有薄骨片或盖玻片的培养板中进行培养。细胞完全展开后即可固定做原代鉴定。
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